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台盼蓝染色后活细胞和死细胞的区别(台盼蓝染色分辨死活细胞的原理是什么)

综合快讯
导读 原理:活细胞不会被台盼蓝染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活...
2024-06-30 12:35:47

原理:活细胞不会被台盼蓝染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。

台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

扩展资料台盼蓝染色步骤:4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。

使用时。

用PBS稀释至0.4%。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

(终浓度0.04%)4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,台盼蓝在2B类致癌物清单中。

参考资料来源:百度百科-台盼蓝。

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